Влияние сверхэкспрессии гена 5-нт7 рецепторов в мозге на регуляцию нормального и депрессивно-подобного поведения и пластичность серотониновой системы мозга

Вид работы: Дипломная работа | Предмет работы: Другое... | Количество листов: 108

Актуальность проблемы. Депрессивные расстройства представляют собой значительную медико-социальную проблему из-за их распространенности в индустриальном обществе, снижения качества жизни и работоспособности, а также повышенного риска сердечной недостаточности и самоубийств у пациентов с депрессией [1]. Изучение патофизиологических процессов, лежащих в основе этого расстройства, привело к укреплению понимая исключительной сложности механизмов депрессии. Несмотря на то, что этиология депрессивных расстройств остается не выясненной, уже более чем 60 лет изучение патогенеза депрессии остается сосредоточено на серотониновой системе [2].

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ 2
ОГЛАВЛЕНИЕ 3
ВВЕДЕНИЕ 5
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 11
1.1. СЕРОТОНИНОВАЯ СИСТЕМА В ЦНС 11
1.2. ЦЕНТРАЛЬНЫЕ 5-НТ РЕЦЕПТОРЫ 14
1.3. 5-HT1A РЕЦЕПТОРЫ 17
1.3.1. Характеристика 5-НТ1А рецепторов 17
1.3.2. Канонические сигнальные пути 5-НТ1А рецепторов 19
1.3.3. Неканонические сигнальные пути 5-НТ1А рецепторов 20
1.3.4. Механизмы десенсетизации 5-НТ1А рецепторов 22
1.3.5. Влияние 5-НТ1А рецепторов на тревожность, агрессивное и депрессивное поведение 23
1.4. 5-HT7 РЕЦЕПТОРЫ 24
1.4.1. Характеристика 5-НТ7 рецепторов 24
1.4.2. Канонические сигнальные пути 5-НТ7 рецепторов. 25
1.4.3. Неканонические сигнальные пути 5-НТ7 рецепторов 26
1.4.4. Механизмы регуляции 5-НТ7 рецепторов 27
1.4.5. Физиологические функции, опосредуемые 5-НТ7 рецепторами 27
1.4.6. Роль 5-НТ7 рецепторов в формировании рецепторных комплексов 29
1.5. МОДЕЛИРОВАНИЕ ДЕПРЕССИИ И ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНЫХ СОСТОЯНИЙ 33
1.5.1. Проблема депрессивных расстройств в современном мире 33
1.5.2. Моделирование депрессии и депрессивно-подобных состояний 35
1.5.3. Животные модели первичной депрессии 38
1.5.4. Животные модели вторичной или ятрогенной депрессии 41
1.5.5. Генетические модели депрессии 42
1.6. ВИРУСНЫЕ ВЕКТОРЫ КАК ИНСТРУМЕНТЫ НЕЙРОБИОЛОГИИ 43
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 49
2.1. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ЖИВОТНЫЕ 49
2.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СЕРИИ 49
2.3. МЕТОДЫ КЛЕТОЧНОЙ БИОЛОГИИ 50
2.3.1. Поддержание клеточной линии и трансфекция 50
2.3.2. Наработка вирусных частиц. 51
2.3.3. Первичная нейрональная культура 51
2.4. ГЕННО-ИНЖЕНЕРНЫЕ МЕТОДЫ 52
2.5. СТЕРЕОТАКСИЧЕСКИЙ МЕТОД 52
2.6. ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ 54
2.7. ПОВЕДЕНЧЕСКИЕ ТЕСТЫ 54
2.7.1. Тест «открытое поле» 54
2.6.2. Тест «принудительное плавание» 55
2.7. ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ 55
2.7.1. Выделение общей РНК 55
2.7.2. Реакция обратной транскрипции 56
2.7.3. Полимеразная цепная реакция в реальном времени (real–time PCR). 56
2.8. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ 57
2.8.1. Реактивы 57
2.8.2. Экстракция 58
2.8.3. Хроматографический анализ 58
2.8.4. Количественный анализ 59
2.8.5. Обоснование метода 59
2.9. ИЗМЕРЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА ПО ПРОТОКОЛУ БРЭДФОРДА 60
2.10. WESTERN-BLOT АНАЛИЗ 61
2.11. СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ И ПРЕДСТАВЛЕНИЕ ДАННЫХ 62
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ 64
3.1. ОЦЕНКА РАБОТОСПОСОБНОСТИ AAV_SYN_HTR7-EGFP И AAV_SYN_EGFP ВЕКТОРНЫХ КОНСТРУКТОВ 64
3.2. СВЕРХЭКСПРЕССИЯ 5-НТ7 РЕЦЕПТОРА В СРЕДНЕМ МОЗГЕ У МЫШЕЙ ЛИНИИ С57BL/6J 67
3.2.1. Поведенческие тесты 67
3.2.1. Уровень мРНК и белка 68
3.2.1. Уровень обмена серотонина 70
3.3. СВЕРХЭКСПРЕССИЯ 5-НТ7 РЕЦЕПТОРА В СРЕДНЕМ МОЗГЕ У МЫШЕЙ ЛИНИИ ASC/ICG 72
3.3.1. Поведенческие тесты 72
3.3.2. Уровни мРНК и белка 73
3.2.1. Уровень обмена серотонина. 75
3.4. СВЕРХЭКСПРЕССИЯ 5-НТ7 РЕЦЕПТОРА В ПРЕФРОНТАЛЬНОЙ КОРЕ У МЫШЕЙ ЛИНИИ С57BL/6J 77
3.4.1. Поведенческие тесты 77
3.3.2. Уровни мРНК и белка 78
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 80
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 88
ВЫВОДЫ 89
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 91

ПОМОЩЬ С НАУЧНОЙ РАБОТОЙ

Подготовим для Вас работу по стандартам Вузов

Готовая работа с высокой уникальностью по минимальной цене

Срок выполнения от 2 часов

Антиплагиат более 70%

Быстрый заказ работы