Совершенствование средств диагностики пастереллеза сельскохозяйственных животных и методов идентификации его возбудителей

Совершенствование средств диагностики пастереллеза сельскохозяйственных животных и методов идентификации его возбудителей

Вид работы: Дипломная работа  |   Предмет работы: Медицинское право   |   Количество листов: 91

В более позднем исследовании, проведённом в Китае в 2011-2015 гг, было выявлено 14 токсигенных штаммов из 296, процент токсигенных изолятов (4,7%) не изменился. Все изоляты были выделены от свиней с клиническими признаками атрофического ринита и относились к типу D. 10 из изолятов выделены совместно с Bordetella bronchiseptica [101]. В исследовании, проведённом во Вьетнаме, Vu-Khac и коллеги обнаружили ген toxA в 16 изолятах (19%), принадлежащих к серогруппе D, но не детектировали этот ген в изолятах серогрупп A и B. В Греции в 2015 году опубликованы данные по выявлению токсигенных P. multocida с использованием двух описанных выше протоколов ПЦР [155]. Наличие гена токсина выявлено в 42,9% образцов. Только 2,3% изолятов от свиней с клиническими проявлениями пневмонии были токсигенными. Данные результаты согласуются с аналогичными исследованиями, в которых P. multocida, продуцирующие дермонекротоксин, часто обнаруживают при атрофическом рините и лишь в редких случаях (0-10%) при пневмонии [17, 32, 54,150]. Среди образцов от крупного рогатого скота только 6,3% изолятов обладали геном toxA. Однако превалирующая часть образцов от мелкого рогатого скота (93.2% изолятов от овец и 85.7% от коз) оказались положительными на наличе гена toxA, что неожиданно поскольку ген дермонекротоксина принято ассоциировать с атрофическим ринитом свиней. Полученные результаты указывают на то, что токсигенные штаммы P. multocida могут иметь важное эпидемиологическое значение для овец и коз. Учитывая тот факт, что штаммы, тестируемые в данном исследовании, выделены от животных с пневмонией легких, роль дермонекротоксина в возникновении легочных поражений и патогенез пневмонии у мелких жвачных, по-видимому, имеет большое значение и требует дальнейшего изучения в будущем [155]. Группа индийских учёных во главе с Rajkhowa разработали систему мультиплексных полимеразных реакций для одноврменной амплификации 11 генов факторов вирулентности P. multocida у свиней, включая ген дермонекротоксина [32].


СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………….4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………13
1.1. Эпизоотологические данные……………………………………………….13
1.2. Культуральные и биохимические характеристики P. multocida…………15
1.3. Фенотипическая идентификация P. multocida…………………………….17
1.4. Групповая и серотиповая идентификация пастерелл…………………….18
1.5. Обнаружение и идентификация P. multocida ИФА методами……………18
1.6. Серологические методы типирования пастерелл по капсульным группам..…….22
1.7. Факторы вирулентности P. multocida и гены связанные с вирулентностью.…………24
1.8. Генотипирование. P. multocida по капсульным группам…………………31
1.9.Идентификация гена toxA…………………………………………………..33
1.10. Дермонекротический токсин………………………………………………37
ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ…………………………..41
2.1. Материал и методы исследования…………………………………………41
2.2. Идентификация производственных и музейных штаммов пастерелл….46
2.3. Типирование штаммов пастерелл по капсульным группам в гиалуронидазной в акрифлавиной пробе ……………….47
2.4. Идентификация изолятов P. multocida выделенных из образцов патматериала……………………………………………………………………..52
2.5. Типирование вакцинных и музейных штаммов по капсульной группе молекулярно-генетическим методом……………………………………………53
2.6. Разработка методики и биологический контроль штаммов пастерелл на продукцию дермонекротического токсина…………………………………….53
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ…………………………………………………………………56
3.1. Результаты типирования производственных и музейных штаммов по капсульной группе и наличию гена toxA молекулярно-генетическими методами…56
3.2. Результаты типирования изолятов пастерелл выделенных от свиней по капсульной группе и наличию гена toxA молекулярно-генетическими методами…….60
3.3. Анализ результатов типирования штаммов пастерелл по капсульным группам в реакции в гиалуронидазной в акрифлавиновой пробе и методом ПЦР и молекулярно-генетического типирования на наличие гена toxA….…63
3.4. Результаты идентификации изолятов биохимическими методами, выделенных от крупного рогатого скота и телят старше 6-месячного возраста….77
3.5. Результаты идентификации культур пастерелл, выделенных из патматериала и смывов носовых пазух у поросят в хозяйствах Уральского региона………80
3.6. Результаты детекции дермонекротического токсина у штаммов пастерелл капсульных групп А и Д методом постановки внутрикожной биопробы………82
ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………………88










ПОМОЩЬ С НАУЧНОЙ РАБОТОЙ

Подготовим для Вас работу по стандартам Вузов

Готовая работа с высокой уникальностью по минимальной цене
Срок выполнения от 2 часов
Антиплагиат более 70%

Быстрый заказ работы





[honeypot 2Mp1wUz2rkcR2jj1Ahxo]

Мы перезвоним через 5 минут

Яндекс.Метрика

Error: Please enter a valid email address

Error: Invalid email

Error: Please enter your first name

Error: Please enter your last name

Error: Please enter a username

Error: Please enter a password

Error: Please confirm your password

Error: Password and password confirmation do not match